O BamHI pode ser inativado pelo calor?
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Vídeo: O BamHI pode ser inativado pelo calor?

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Anonim

Embora NdeI posso ser calor inativado , BamHI -HF não pode.

Dessa forma, como você inativa o BamHI?

Aquecer inativação foi realizado como segue para aproximar um experimento típico. Uma mistura de reação de 50 µl contendo o NEBuffer apropriado, 0,5 µg de DNA de timo de bezerro e 5 ou 10 µl de endonuclease de restrição (na concentração de venda) foi incubada a 37 ° C por 60 minutos e, em seguida, a 65 ° C ou 80 ° C durante 20 minutos.

Da mesma forma, qual é o local de restrição para BamHI? BamHI . Restrição endonuclease BamH I ligada a um DNA não específico. BamH I (de Bacillus amyloliquefaciens) é um tipo II restrição endonuclease, tendo a capacidade de reconhecer sequências curtas (6 b.p.) de DNA e clivá-las especificamente em um alvo local.

A este respeito, preciso aquecer a enzima de restrição inativada?

Inativação do restrição endonucleases geralmente não necessário , mas em alguns casos pode aumentar a eficiência da transformação.

O que é inativação por calor?

Aquecer - inativação ( aquecimento a 56 ° C por 30 minutos) é feito para inativar complemento, um grupo de proteínas presentes no soro que fazem parte da resposta imune. Aquecer também foi usado para destruir micoplasma no soro.

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